新技术专栏OpenSPR动力学参数助力

JamesMadisonUniversity的副教授Dr.Wright在肌肉萎缩的研究上取得了新进展。

利用OpenSPR局域表面等离子共振技术获得了实验中的关键分子结合参数,并以“AnovelFLNCframeshiftandanOBSCNvariantinafamilywithdistalmusculardystrophy”为题发表在PLOSONE期刊上。Dr.Wright通过OpenSPR提供的数据,研究出遗传突变在titin,z-disc和obscurin之间的相互作用,解释了上述因素的相互作用是如何影响肌肉萎缩症的外显率,并以此阐述了关于肌肉萎缩症的进一步研究。

ObscurinIg58/Ig59和titin(肌联蛋白)ZIg9/ZIg10的相互作用对于OBSCN固定到心肌细胞的Z盘(Z-disc)至关重要。最近,在法国的一例病人身上确认了FLNC基因移码突变和OBSCN突变体。OBSCNIg59功能域上的p.ArgTrp突变体与Ig58一起在Z盘处结合到titin的ZIg9/ZIg10的区域。为了验证OBSCN蛋白变体和titin肌联蛋白的相互作用,利用Nicoya的OpenSPR仪器和GST功能芯片检测Ig58/Ig59的野生型和突变体与titinZIg9/ZIg10的相互作用,并得到很好的结合参数。

实验结果和结论:

OpenSPR为Ig58/Ig59和ZIg9/ZIg10相互作用实验提供了详细的结合动力学参数,包括结合常数和解离常数。结果显示,OBSCN突变体使得Ig58/Ig59位点与titinZIg9/ZIg10相互作用水平降低。OBSCN的突变体和野生型与titin间的相互作用KD值相差15倍,分别是1.6uM和nM。

通过OpenSPR给出的详细数据,Dr.Wright和他的同事能够确认Z盘(Z-disc)突变的影响因素,得到定量数值(15倍差值)和动力学参数。

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